产品详情
SDT裂解液(pH7.6,蛋白提取)说明书
货号:D02725
规格:100mL
保存:-20℃保存,保质期12个月。
产品简介:
SDT裂解缓冲液用于裂解哺乳动物细胞和组织。其成分为2%SDS,100mMDTT,100mM Tris-HCL,pH7.6,对样本全蛋白有很好的提取效果。但其中所含的SDS会使蛋白质变性失活,因此不适合后续活性相关实验。
试剂请于避光保存,以确保其稳定性。
操作步骤(仅供参考):
- 取100mg动物组织或细胞(组织提前剪成小块)加入500μL PBS溶液中初步匀浆(60Hz,45s),再加入500μL SDT裂解液。
- 将上一步加有SDT裂解液的动物组织或细胞于 4℃进行匀浆(60Hz,20s)。
- 低速短暂离心将管壁液体离下,后置于沸水浴(或100℃)3min。
- 再次使用探头超声:40-50W 超声 5s,间隔 5s,一共6个循环。
- 将溶液置于沸水浴(或100℃)2min,10000g 离心10min。
- 收集上清进行后续实验。
注意事项:
- 为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
2. 该试剂仅用于科研领域,不得用于临床诊断或其他用途。
3. SDT裂解液不适用于后续做与活性相关的实验,如免疫共沉淀。在进行蛋白质浓度测定时由于SDT裂解液中含有SDS和DTT,因此Bradford法和BCA方法不适用,而应选择去垢剂和还原剂均兼容的荧光法测定蛋白质浓度。各种裂解液中含有的去垢剂均会影响胰蛋白酶活性,并且对质谱分析产生很大影响,因此均需要在蛋白质样品酶解前除去。
4. SDT裂解液中含有较高浓度的SDS,在低温下可能析出为正常现象,使用前只需将溶液置于37℃加热5-10min或至溶解即可。