产品详情
鼠尾样品裂解液(不含蛋白酶K)说明书
货号:D02800
规格:500mL
保存:RT保存,有效期12个月
自备试剂:
蛋白酶K溶液(10mg/mL),异丙醇,70%乙醇,TE或者水都可以。
裂解液准备:
每毫升裂解液中加入40uL 的蛋白酶K溶液(10mg/mL)。
裂解歩骤:
1、剪切鼠尾,尽量剪碎:
2、加入750uL的裂解液(确认己经加入蛋白酶K):
3、55°C至少保温3h以上(每隔一小时震荡10s),或者直接55℃保温20h(可以过夜,或者放48小时都可以)。
4、70°C保存5min,冰上放置5min
纯化步骤方法一(沉淀法):
1、12000rmp/min离心10min,取上清(上清中含DNA);
2、将上清加入等体积(720uL)的异丙醇中;
3、颠倒混匀,-20°C放置15-30min;
4、12000rmp/min离心10-20min。小心吸弃上清(沉淀中含 DNA);
5、用70%乙醇冲洗管壁(0.5-10mL),12000rmp/min离心10min,小心吸弃上清;
6、自然干燥或者吹风机吹干后,加入50uLTE(TE可以65°C预热后加入)溶解沉淀;
7、所得DNA可直接作为PCR的模板使用。