EGTA抗原修复液(50×，pH8.0)说明书
货号：P00585
规格：100mL/500mL
保存：2-8℃保存，有效期12个月
产品简介：
EGTA抗原修复液（pH 8.0）是一种常用的抗原修复液，可以用于石蜡切片、冰冻切片等样品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后的抗原修复。有研究表明，EGTA的暴露能力强于EDTA和柠檬酸，可能是因为EGTA是Ca2+螯合剂，对Mg2+ 几乎不起作用，其选择性提高，而EDTA两者都螯合；当然也可能与抗体自身有关，其机制尚不完全清楚。
通常石蜡切片都需进行抗原修复处理，而冰冻切片可以不进行抗原修复处理。抗原修复会大大改善石蜡切片的免疫染色效果，但对于冰冻切片的染色效果很多文献资料表明也有显著改善。特别是当冰冻切片免疫染色效果欠佳时，可以考虑尝试进行抗原修复。
从原理上来看，无论冰冻切片还是细胞爬片等，只要是用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定的样品，进行抗原修复都会有效去除蛋白之间的交联，充分暴露抗原表位，从而大大改善免疫染色效果。
本产品特别适合用于石蜡切片，也可以用于冰冻切片等其它样品。
产品特点：
使用方便，能有效去除醛类固定试剂导致的蛋白之间的交联，充分暴露石蜡切片等样品中的抗原表位，从而大大改善免疫染色效果。
操作歩骤：
1.高压蒸汽法
a.抗原修复：压力锅中加入足以淹没切片的1×抗原修复液，加热至沸腾。
b.将脱蜡至水的切片置染色架上，放入锅中，盖好锅盖，扣上压力阀加压，设置保压4min。
c.压力下降后打开锅盖，放置室温冷却，待溶液冷却至室温后取出切片。
d.PBS或TBS洗涤3次，每次5min，随后即可进行后续的免疫染色步骤。
2.蒸煮锅法
a.将置于染色架上的切片放于1×抗原修复液中，95~100°C加热10~20min。
b.冷却至室温后取出，PBS或TBS洗涤3次，每次5min，随后即可进行后续的免疫染色步骤。
3.微波法
a.向微波炉专用容器中加入1×抗原修复液，加热至沸腾。
b.将脱蜡至水的切片置染色架上，放于容器中，煮沸10~20min。
c.冷却至室温后取出，PBS或TBS洗涤3次，每次5min，随后即可进行后续的免疫染色步骤。
4.对于其他切片
对于其它样品的抗原修复，可以参考石蜡切片的步骤进行。
注意事项:
1.本抗原修复液使用前须用重蒸水或去离子水稀释100倍，配制成1×抗原修复液。
2.抗原修复的时间为建议时间，请根据不同的样品、抗体和抗原自行摸索。
3.抗原修复后，待溶液冷却至室温后再取出切片，使抗原表位在经历高温后复原。
4.抗原修复液的加入量要足以淹没切片几厘米，防止在煮沸过程中切片变干。
5.抗原修复过程需使用耐热染色架进行操作。
6.为了您的安全和健康，请穿实验服戴一次性手套操作。